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談?wù)劶?xì)胞凋亡的效應(yīng)機(jī)制
2020-10-28
今天來(lái)了解一下細(xì)胞凋亡的效應(yīng)機(jī)制吧凋亡細(xì)胞的特征性表現(xiàn)，包括DNA裂解為200bp左右的片段，染色質(zhì)濃縮，細(xì)胞膜活化，細(xì)胞皺縮，后形成由細(xì)胞膜包裹的凋亡小體，然后，這些凋亡小體被其他細(xì)胞所吞噬，這一過(guò)程大約經(jīng)歷30-60分鐘，Caspase引起上述細(xì)胞凋亡相關(guān)變化的全過(guò)程尚不*清楚，但至少包括以下三種機(jī)制：1凋亡抑制物正?；罴?xì)胞因?yàn)楹怂崦柑幱跓o(wú)活性狀態(tài)，而不出現(xiàn)DNA斷裂，這是由于核酸酶和抑制物結(jié)合在一起，如果抑制物被破壞，核酸酶即可激活，引起DNA片段化?，F(xiàn)知caspase...
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ELISA試劑盒的基本原理有這三條，你知道嗎？
2020-10-26
ELISA試劑盒因此含雜質(zhì)較多的抗原也可選用捕獲包被法,試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附聯(lián)絡(luò)的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的效果于?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射(例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí))，以增加其吸附功能。例如，在檢查抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，ELISA試劑盒而廣泛的固相載體一般不能直接與核酸聯(lián)絡(luò)。換言之，包被就是抗原或抗體聯(lián)絡(luò)到固相載體表面的進(jìn)程。當(dāng)抗原決定簇...
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ELISA試劑盒洗滌的兩大方法
2020-10-14
洗滌雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELISA靠洗滌來(lái)達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過(guò)洗滌以清除殘留在板孔中沒(méi)能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。重點(diǎn)分析：ELISA試劑盒洗滌的兩大方法一、浸泡式1.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液;2.用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后，即甩去);3.浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖動(dòng)，浸泡時(shí)間不可隨意縮短;4.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液...
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ELISA試劑盒在試驗(yàn)過(guò)程中需要注意什么
2020-10-12
ELISA試劑盒是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的試驗(yàn)確診方法。盡管ELISA試劑盒的操作過(guò)程看似簡(jiǎn)單，但沒(méi)做到位的話就會(huì)影響試驗(yàn)的作用。所以在試驗(yàn)過(guò)程中這幾點(diǎn)非常重要：1、重要的洗刷：不充分的洗刷會(huì)導(dǎo)致差異和高布景，從而帶來(lái)不抱負(fù)的試驗(yàn)結(jié)果。假如未結(jié)合的材料殘留在微孔板中，那么它會(huì)添加布景噪音。有必要的話，可添加洗刷液中的鹽濃度，這會(huì)阻止非特異結(jié)合反響。假如布景過(guò)高，置疑洗刷不行時(shí)，能夠測(cè)驗(yàn)添加洗刷次數(shù)。2、關(guān)鍵的關(guān)閉：關(guān)閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位...
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ELISA試劑盒的選購(gòu)指南
2020-09-27
目前市場(chǎng)上的ELISA試劑盒質(zhì)量參差不齊，如何去挑選適合自己的試劑盒就顯得特別重要，具體有以下幾點(diǎn)可供參考：一、特異性：ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的關(guān)鍵組分，抗體對(duì)有關(guān)，若抗體對(duì)中之一為多抗，另一個(gè)必須為單抗，建議使用雙單抗。二、靈敏度：靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的量的能力，用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標(biāo)的量選擇合適的試劑盒，如果待檢指標(biāo)量很低，一般的試劑盒不能滿足要求，可選擇高敏的ELISA試劑盒。三、重復(fù)性：科學(xué)實(shí)驗(yàn)講求重復(fù)性，一般ELISA試劑盒，其板內(nèi)和板間...
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你知道緩沖液的原理嗎？
2020-09-25
當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿時(shí)，有阻礙溶液pH變化的作用，稱為緩沖作用，這樣的溶液叫做緩沖溶液。弱酸及其鹽的混合溶液(如HOAc與NaOAc)，弱堿及其鹽的混合溶液(如NH3·H2O與NH4Cl)等都是緩沖溶液。由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對(duì)酸的緩沖作用，是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故。當(dāng)向這種溶液中加入一定量的強(qiáng)酸時(shí)，H+離子基本上被A-離子消耗:所以溶液的pH值幾乎不變;當(dāng)加入一定量強(qiáng)堿時(shí)，溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。在緩沖溶液...
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胰蛋白酶消化液對(duì)細(xì)胞的分離效果與哪些因素有關(guān)
2020-09-23
在組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)中的組織細(xì)胞分散(將組織塊制備成單個(gè)細(xì)胞懸液)和傳代細(xì)胞培養(yǎng)中,貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞的消化分散均要使用組織細(xì)胞消化液.胰蛋白酶消化液一共有三種,分為胰蛋白酶-EDTA消化液(不含酚紅);胰蛋白酶-EDTA消化液(含酚紅);胰蛋白酶消化液(不含酚紅),可根據(jù)客戶的需要來(lái)選擇.其中,胰蛋白酶含量為0.25%(2.5g/L),EDTA含量為0.02%(0.2g/L).PBS為常用的不含鈣鎂的細(xì)胞培養(yǎng)用PBS.經(jīng)無(wú)菌過(guò)濾,可直接使用.胰蛋白酶消化液對(duì)細(xì)胞的分...
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衣霉素的用途及作用機(jī)理講解
2020-09-23
衣霉素為放線菌產(chǎn)生的核苷酸抗生素(antibiotic)。可抑制具有被膜(envelope，含糖蛋白)的病毒的繁殖。作用機(jī)理是抑制合成糖蛋白糖鏈必需的擬脂(多萜醇，dolichol)中間產(chǎn)物的生成。又因?yàn)樗梢种圃诤铣杉?xì)菌細(xì)胞壁(cellwall)的肽聚糖或胞壁酸中必需的擬脂(細(xì)菌萜醇，多聚萜醇)中間產(chǎn)物的形成，所以顯示對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌的抗菌性。z近，利用這種抑制擬脂中間產(chǎn)物形成的作用，來(lái)探索糖類復(fù)合物的活體合成及其功能。衣霉素用途：生化試劑。衣霉素為鏈霉菌屬Streptomy...
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