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LB培養(yǎng)基的作用及配置
2015-12-30
LB培養(yǎng)基是微生物學(xué)實驗中常用的培養(yǎng)基，用于培養(yǎng)大腸桿菌等細菌。其分為液態(tài)或是加入瓊脂制成的固態(tài)培養(yǎng)基。早LB培養(yǎng)基中加入抗生素還可用于大腸桿菌為宿主的克隆。LB一般被解釋為Luria-Bertani培養(yǎng)基,然而根據(jù)其發(fā)明人貝爾塔尼(GiuseppeBertani)的說法,這個名字來源於英語的lysogenybroth,即溶菌肉湯。LB培養(yǎng)基的配置：成分：胰蛋白胨(tryptone)10g；酵母提取物(yeastextract)5g；氯化鈉(NaCl)10g；配制方法：（1）...
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青鏈霉素混合液的特點及制備
2015-12-30
青鏈霉素混合液又稱雙抗，是專門用于細胞培養(yǎng)的,可以直接添加到細胞培養(yǎng)液內(nèi)。青霉素-鏈霉素溶液(100X)中，青霉素的含量為10000U/ml，鏈霉素的含量為10mg/ml。在細胞培養(yǎng)液中推薦的青霉素的工作濃度為100U/ml，鏈霉素的工作濃度為0.1mg/ml。雙抗起的作用為抗生素、抑制細菌生長、避免細胞污染。青鏈霉素混合液的制備用20mL空針抽16毫升三蒸水(或PBS)，溶160萬單位/瓶的青霉素G鈉一支，過濾除菌；用10mL空針抽10毫升三蒸水(或PBS)，溶一支100萬...
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免疫組化各步驟中應(yīng)注意事項
2015-12-30
免疫組化，是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對其進行定位、定性及定量的研究。在免疫組化試驗中應(yīng)該注意以下事項。1．固定：好用4%的多聚甲醛固定液。對于冰凍切片，甲醛固定有時比冰凍丙酮好；但對于不同的組織和抗原，可選用不同的固定液。有時候商品化的抗體會有比較適合而推薦的固定液，請于購置前注意說明書。BouinS固定液：飽和750ml，甲醛250ml，冰醋酸50...
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分類介紹蛋白marker的原理及作用
2015-12-28
蛋白質(zhì)marker指的是做western時,用來參照的標(biāo)準(zhǔn)蛋白,顯示蛋白大小,用以與自己蛋白進行對比,估計蛋白大小。在免疫印跡（Westernblot）試驗中，分子量Marker雖不起眼，但意義重大，是陽性對照，是大小的標(biāo)準(zhǔn)，是必須的。蛋白marker的分類：一.未染色(premixed)蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)未染色的蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)是簡單，也是準(zhǔn)確的一種。由于沒有附帶染料分子或者是標(biāo)記分子，所示大小正好是蛋白原本的大小，是判斷蛋白大小必須的?，F(xiàn)在的marker多數(shù)都選用預(yù)混和的Mar...
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【產(chǎn)品資訊】CCK-8細胞增殖及毒性檢測試劑盒說明書
2015-12-28
CCK-8細胞增殖及毒性檢測試劑盒說明書產(chǎn)品簡介：CellCountingKit-8簡稱CCK-8試劑盒，為MTT法的替代方法，是一種基于WST（水溶性四唑鹽，化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒?？捎糜谒幬锖Y選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗。使用說明：一、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線（測定細胞具體數(shù)量時（測定細胞具體數(shù)量時）1、先用細胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細...
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胰蛋白酶消化液的作用用途及使用方法
2015-09-29
胰蛋白酶消化液的作用用途及使用方法胰蛋白酶消化液為蛋白酶的一種，EC3.4.4.4，是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動物中，作為消化酶而起作用。在胰臟是作為酶的前體胰蛋白酶原而被合成的。作為胰液的成分而分泌，受腸激酶，或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶，是肽鏈內(nèi)切酶，它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切斷。它不僅起消化酶的作用，而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體，起活化作用。是特異性強的蛋白酶，在決定蛋白質(zhì)的氨基酸排列...
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衣霉素的作用機理及說明
2015-09-08
衣霉素的作用機理及說明衣霉素tunicamycin，為放線菌Streptomyceslysosuperficus產(chǎn)生的核苷酸抗生素。可抑制具有被膜（envelope，含糖蛋白）的病毒的繁殖。衣霉素作用機理是抑制合成糖蛋白糖鏈必需的擬脂（多萜醇，dolichol）中間產(chǎn)物的生成。比如：在天冬酰胺的糖蛋白糖鏈的生物合成中，抑制N-乙酰葡萄糖胺-1-磷酸轉(zhuǎn)移到脂質(zhì)載體上。。又因為它可抑制在合成細菌細胞壁的肽聚糖或胞壁酸中必需的擬脂（細菌萜醇，多聚萜醇）中間產(chǎn)物的形成，所以顯示對革蘭...
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【產(chǎn)品資訊】細胞凍存液的原理及配制方法
2015-08-31
【產(chǎn)品資訊】細胞凍存液的原理及配制方法細胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少細胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復(fù)蘇細胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷。細胞凍存是細胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實驗順利進行的重要...
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