胰蛋白酶消化液的詳細(xì)配置說(shuō)明

更新時(shí)間：2017-10-09

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胰蛋白酶消化液的詳細(xì)配置說(shuō)明

　　胰蛋白酶消化液配置

　　配置步驟

　　1．D-Hanks液高壓滅菌之后，晾室溫，4℃保存?zhèn)溆谩?/div>

　　2．稱(chēng)取一定量胰蛋白酶粉末于研磨器中(夏天時(shí)研磨器應(yīng)放在冰浴中)，加入少量D-Hanks液研磨1 000次左右，調(diào)制成糊狀。再放入4℃預(yù)冷的適量D-Hanks液中，4℃下磁力攪拌使*溶解。

　　3．用NaHCO3干粉將胰酶溶液的pH值調(diào)8.0左右(胰酶作用的適pH值)，并加入0.02%EDTA以協(xié)助消化作用。

　　4．濾過(guò)除菌，-20℃凍存。

　　胰蛋白酶消化液配置過(guò)程中的注意事項(xiàng)：

　　1．BSS的pH值應(yīng)確定為7.2左右。

　　2．如配制的Hanks液高壓滅菌后液體變混，則可將100 mL的CaCl2與含有其他成分的液體分別裝瓶高壓滅菌之后，再在無(wú)菌條件下配制，定容。這樣可以避免高壓滅菌后液體變混。

　　3．胰酶受熱易失活，所以盡量避免盛夏配制，并且在配制過(guò)程中溫度應(yīng)始終保持在4℃左右。

　　4．胰酶研磨要充分，否則在過(guò)濾時(shí)會(huì)將較大的顆粒過(guò)濾掉，不能達(dá)到真正的濃度。

　　5．胰酶分裝時(shí)盡量分裝成多瓶，并遵守3次左右用完和只裝2/3體積的原則。因?yàn)槔鋬霰４鏁r(shí)體積會(huì)膨脹，而多次使用同一瓶胰酶反復(fù)凍融會(huì)降低消化效果并可能造成污染。

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