貨號：C0040

規(guī)格：50  mL/100mL/500mL

保存：2-8℃保存，有效期1年。

產(chǎn)品介紹：

臺盼藍(lán) (TrypanBlue)或稱臺盼蘭、錐蟲藍(lán)，是細(xì)胞活性染料，常用于檢測細(xì)胞膜的完整性與細(xì)胞的存 活率，是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。正常的活細(xì)胞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥 臺盼藍(lán)，細(xì)胞不會被染成藍(lán)色；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞可被臺盼藍(lán)染成藍(lán)色。通常認(rèn)為細(xì)胞膜 完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。

臺盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬，故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。凋亡小體也有臺盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。臺盼藍(lán) 染色后，通過顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù)，就可以對細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量：臺盼 藍(lán)染色液，0.4%常用于顯微鏡下細(xì)胞計(jì)數(shù)，染色時(shí)間只需3-5 分鐘，操作簡單。

操作步驟：(僅供參考

1. 收集細(xì)胞：

對于貼壁細(xì)胞先用胰酶消化處理；對于懸浮細(xì)胞，則可以直接收集細(xì)胞。把收集的細(xì)胞在1000-2000rpm 離心3分鐘，棄上清，加入適量PBS 重新懸起細(xì)胞，制備單細(xì)胞懸液。

2. 臺盼藍(lán)染色：

細(xì)胞懸液與0.4%臺盼藍(lán)溶液以9:1 比例混勻(終濃度0 . 04%),染色3分鐘(染色3分鐘時(shí)間已經(jīng) 足夠，但染色時(shí)間可以更長一些，但不宜超過10分鐘)。

3. 細(xì)胞計(jì)數(shù)：

吸取少量經(jīng)過染色的細(xì)胞，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。死細(xì)胞著藍(lán)色并膨大，無光澤：活細(xì)胞不著色并保 持正常形態(tài)，有光澤。通常要比較精確地進(jìn)行定量，每個(gè)細(xì)胞樣品至少數(shù)500 個(gè)細(xì)胞。

細(xì)胞存活率(%)=活細(xì)胞總數(shù)/(活細(xì)胞總數(shù)+死細(xì)胞總數(shù))×100%

注意事項(xiàng)：

1.  染色時(shí)間不能太長，否則活細(xì)胞也會逐漸積累染料而著色，使檢測結(jié)果偏低。

2.  染色前染液若有沉淀，需過濾除掉沉淀后再用。

3.  有潛在致癌危險(xiǎn)，為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

相關(guān)產(chǎn)品：

31800 RPMIMedium1640

24800 通用細(xì)胞凍存液

H1025 Hanks, 含鈣鎂，不含酚紅 (HBSS)

P10201×PBSPH7.2-7.4,0.01M,      液體

T1300   胰蛋白酶—EDTA  消化液(0. 25%)不含酚紅

P1400    青鏈霉素混合液(100×)

M1020 MTT  細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒

相關(guān)文獻(xiàn)：

[1]Dan Xiao,Yue Zhang.RuI Wang,et al Emodinalleviates cardac fibrosis by suppressing activation of cardi-acfibroblasts via upregulating metastasis  associated  protein  3.Acta  Pharmaceutica  Sinica  B  April  2019(IF  5.808)

[2]Chunping  Yang,Tianxing  Lv,Bin  Wang,et  al  The  Damaging  Effects  of  Pedunsaponin  A  on  Pomacea  cana-liculata  Hemocytes Toxins.July    2019(IF    3.895)