光影智控·膠蹤無隙——照膠儀全流程操作指南與安全要訣
一、核心操作流程與規(guī)范
設(shè)備準(zhǔn)備與校準(zhǔn)
環(huán)境檢查:確保照膠儀放置在通風(fēng)、干燥、無塵、無振動(dòng)的臺(tái)面,溫度15-30℃,濕度≤80%。檢查電源線、數(shù)據(jù)線是否完好,儀器各部件齊全無損壞。
參數(shù)預(yù)設(shè):根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇光源類型(如紫外/藍(lán)光/白光),設(shè)置照射時(shí)間、距離、焦距及曝光強(qiáng)度。
校準(zhǔn)驗(yàn)證:使用標(biāo)準(zhǔn)膠片或同位素內(nèi)標(biāo)進(jìn)行校準(zhǔn),確保儀器準(zhǔn)確性;定期檢查紫外燈管壽命(如使用壽命≥50000小時(shí)),避免衰減影響結(jié)果。
樣品處理與放置
電泳后處理:將凝膠從電泳槽取出后,用1×TBE緩沖液清洗表面雜質(zhì),避免殘留染料干擾成像。若使用染色,需控制染色時(shí)間(如5分鐘),防止過曝。
載膠操作:將凝膠平整鋪在照膠儀載膠板上,確保無氣泡、皺褶,膠孔朝內(nèi)并居中。用鑷子輕壓排盡氣泡,避免影響成像清晰度。
防護(hù)措施:操作時(shí)佩戴護(hù)目鏡和手套,避免直接接觸紫外光源或染料;若使用化學(xué)發(fā)光法,需在暗室環(huán)境下進(jìn)行,減少背景干擾。
成像與數(shù)據(jù)采集
啟動(dòng)與調(diào)整:開啟設(shè)備電源,預(yù)熱10-15分鐘,啟動(dòng)配套軟件。通過軟件界面調(diào)整焦距、光圈及曝光時(shí)間,確保條帶清晰可見。
實(shí)時(shí)監(jiān)控:照射過程中觀察樣品變化,避免移動(dòng)或傾斜載膠板。若采用掃描成像模式,需保持樣品與相機(jī)相對(duì)靜止;拍照成像則需根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度調(diào)整曝光參數(shù)(如化學(xué)發(fā)光需長時(shí)間曝光)。
數(shù)據(jù)保存與分析:成像后保存原始圖像至專用文件夾,使用軟件工具進(jìn)行條帶分析、定量統(tǒng)計(jì)或圖像編輯(如調(diào)整對(duì)比度、標(biāo)注泳道)。結(jié)果需與標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ战M比對(duì),確保準(zhǔn)確性。
設(shè)備維護(hù)與保養(yǎng)
日常清潔:每次使用后關(guān)閉設(shè)備,用軟質(zhì)紙或酒精棉擦拭載膠板、鏡頭及紫外燈箱,避免殘留物影響下次實(shí)驗(yàn)。
定期維護(hù):每兩周進(jìn)行一次全面檢查,包括電源穩(wěn)定性、軟件兼容性及機(jī)械部件磨損情況。更換耗材(如紫外燈管、濾光片)需遵循廠家指南,避免自行拆卸核心部件。
故障處理:若設(shè)備出現(xiàn)異常(如異響、圖像模糊),立即停止使用并聯(lián)系維修人員。避免自行修理或更改安全裝置,防止二次損壞或安全事故。
二、安全與防護(hù)要點(diǎn)
人員防護(hù):操作時(shí)穿戴防護(hù)裝備(如護(hù)目鏡、手套、防靜電服),避免直接暴露于紫外光下。長發(fā)需束起,防止卷入設(shè)備。
環(huán)境安全:保持實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)良好,避免易燃易爆物品靠近加熱設(shè)備(如電泳儀、照膠儀)。若使用有毒染料(如EB),需在通風(fēng)柜中操作并妥善處理廢棄物。
應(yīng)急處理:遇緊急情況(如漏電、火災(zāi)),立即切斷電源并啟動(dòng)應(yīng)急預(yù)案。熟悉設(shè)備斷電按鈕位置,確保快速響應(yīng)。
培訓(xùn)與考核:操作人員需經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)并考核合格后方可獨(dú)立使用設(shè)備,定期參加復(fù)訓(xùn)以更新操作技能和安全知識(shí)。