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P1200 SDS-PAGE凝膠制備試劑盒參考說(shuō)明書

發(fā)布時(shí)間:2026/1/8點(diǎn)擊次數(shù):29

本公司生產(chǎn)的SDS-PAGE凝膠制備試劑盒是按照經(jīng)典方法配制而成。本試劑盒提供了配制SDS-PAGE凝膠所需的各種試劑,用戶只需自備制膠器具和蒸餾水,即可配制PAGE膠。本試劑盒可配制不同規(guī)格、不同聚合度的PAGE膠(即聚丙烯酰胺凝膠) 約25/50塊。

注意事項(xiàng):

1. PAGE膠促凝劑和10%PAGE膠凝固劑最后加,在加入前需混勻前面所加試劑。10%PAGE膠凝固劑溶液在4℃有效期為一周;PAGE膠促凝劑易揮發(fā),使用后請(qǐng)蓋緊瓶蓋。在常溫下膠30分鐘內(nèi)可以凝固,如溫度過(guò)低,可放37℃溫箱凝固。灌完分離膠后,輕輕的加1mL ddH2O封上層,膠凝固后可見到分界線。灌濃縮膠前,先傾去水層,再用吸水紙吸干。濃縮膠灌好后立刻插入梳子。濃縮膠凝固后,放入電泳液中(讓電泳液漫過(guò)加樣孔),輕輕的撥出梳子,可防加樣孔變形。

2. 配制量可按上表等比加減。如果所用膠濃度與上面不同,可自行調(diào)整,主要是調(diào)整30% 制膠液的量(需要濃度×總體積/30%),最后用水補(bǔ)足總體積。

配膠說(shuō)明:

1. 先在PAGE膠凝固劑干粉中加入蒸餾水或去離子水(每克PAGE膠凝固劑需加水10mL)配置成10%溶液,將溶液分裝成小體積后凍存于-20℃,制備凝膠時(shí)融化后使用。4℃保存有效期為一周。檢測(cè)SDS溶液是否澄清,若出現(xiàn)絮狀物或沉淀可放37℃片刻至溶解,不影響效果。

2. 根據(jù)目標(biāo)蛋白分子量大小,選取凝膠濃度,按下表配制。先配分離膠,再配濃縮膠。



分離膠15%分離膠12%分離膠10%分離膠8%濃縮膠5%
總體積10mL10mL10mL10mL5mL
30%Acr/Bis(29:1)5mL4mL3.3mL2.7mL0.83mL
1M Tris-HCI(PH6.8)00000.625mL
1.5M Tris-HCI(PH8.8)2.5mL2.5mL2.5mL2.5mL0
10%SDS100μL100μL100μL100μL50μL
10%PAGE膠凝固劑100μL100μL100μL100μL75μL
PAGE膠促凝劑10μL10μL10μL10μL7.5μL
ddH202.3mL3.3mL4.0mL4.6mL3.42mL
最佳分離范圍10-40kD12-60 kD20-80 kD30-90kD

注意事項(xiàng)


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