細胞培養(yǎng)基中有時加入適量濃度的抗生素，可以有效防止微生物的污染。目前，常采用的抗 生素為青霉素-鏈霉素混合溶液(100×雙抗)。青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液(100×三抗) (Penicillin-Streptomycin-Gentamicin Solution, 100×)是專門用于細胞培養(yǎng)的三抗，經(jīng)過濾除菌，可 以直接添加到細胞培養(yǎng)液內(nèi)。  青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液(100×三抗)中青霉素的含量為10kU/ml，鏈霉素的含量為 10mg/ml，慶大霉素的含量為5mg/ml。該溶液用0.9%NaCl或PBS配制，在細胞培養(yǎng)液中推薦的青霉 素工作濃度為100U/ml，鏈霉素工作濃度為0.1mg/ml，慶大霉素的工作濃度為50µg/ml，即按照100 倍稀釋使用即可。一個包裝即100ml青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液(100×三抗)可以配制10L細胞 培養(yǎng)液。  

    青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液(100×三抗)可以參考如下兩種方法之一使用： 

1、 在無菌的細胞培養(yǎng)液中直接添加：按照每500ml細胞培養(yǎng)液添加5ml的比例加入青霉素-鏈霉素慶大霉素混合溶液(100×三抗)，混勻即可使用。 

2、 配制細胞培養(yǎng)液時加入，然后再過濾除菌：配制細胞培養(yǎng)液時按照每配制1L細胞培養(yǎng)液加入10ml 的比例加入青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液(100×三抗)，配制完成后過濾除菌即可使用。 

  1. 盡量減少反復凍融的次數(shù)，以免效率下降。 

 2. 注意無菌操作，盡量避免污染。 

 3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。